培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080),85%;北美胎牛血清(United States,GIBCO,貨號16000-044),15%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。
描述:(1)公司可提供新鮮或凍存細胞株;(2)細胞株數(shù)量約 5×105/瓶;(3)不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。
發(fā)貨:客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細胞密度。發(fā)貨的新鮮細胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基;2、說明書及注意事項;3、公司售后服務(wù)標準。
保存和應(yīng)用:客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞,如是新鮮細胞株,客戶收到細胞后應(yīng)立即將其放入CO2細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h,再進行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細胞,客戶收到細胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復(fù)蘇。該細胞只可用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。
產(chǎn)品名稱 | CHL倉鼠肺細胞 |
規(guī)格 | 5×105/瓶 |
貨號 | CS-X3236 |
細胞分類:
一種:
是凍存產(chǎn)品,由氮直液接拿出,干冰運輸給客戶。一般不推薦這種,也較少使用這種方式,因為復(fù)蘇手法對于細胞狀態(tài)影響較大,一旦細胞狀態(tài)不好,很難說是細胞自身不行,還是復(fù)蘇沒操作好;另外溫度對細胞、基因功能狀態(tài)影響很大,也不是細胞儲存的方式,快遞時間也很難控制,多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量;干冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐)。
第二種:
是我們復(fù)蘇好細胞,QC通過后,T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運輸給客戶,排除復(fù)蘇造成影響,常溫運輸也對細胞影響也不大,只需加25元運費(順豐)。
質(zhì)量保證:我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,進口來源,保證5代以內(nèi),活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。
細胞培養(yǎng)的優(yōu)點:
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中,根據(jù)要求可始終保持細胞活力,并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件,可以根據(jù)實際需要進行人為的控制,同時,可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,需要時,可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標記等各種儀器設(shè)備。
以下是公司正在銷售的相關(guān)產(chǎn)品:
1.875ng/ml禽流感/新城疫病(AIV/NDV)核檢測試盒(熒光-PCR法)Galanin Message Associated Peptide (1-41) amide
0.188ng/ml禽流感通用/H5亞型(AIV-U/AIV-H5)核檢測試盒 (熒光-PCR法)Galanin-Like Peptide (rat)
0.094ng/ml禽流感病H5/H7亞型(AIV-H5/H7)核檢測試盒(熒光-PCR法)Galanin-Like Peptide(porcine)
0.094ng/ml禽流感病H5/H7/H9亞型(AIV-H5/H7/H9)核檢測試盒(熒光-PCR法)Galanin-Like Peptide (human)
0.938ng/ml禽流感病H5/H7/新城疫病(AIV-H5/H7/NDV)核檢測試盒(熒光-PCR法)(D-Arg3)-FMRFamide
0.938ng/ml禽流感H5-H7-H9與新城疫?。∟DV)四重核檢測試盒(熒光-PCR法)(D-Phe4)-FMRFamide
0.188ng/ml禽流感病H3N2(AIV-H3N2)核檢測試盒(熒光-PCR法)(D-Met2)-FMRFamide
0.141ng/ml豬瘟病/豬藍耳病病通用型/高致病性豬藍耳病病(CSFV/PRRSV-U/PRRSV-M)核檢測試盒(熒光-PCR法)(D-Phe1)-FMRFamide
4.688pg/ml豬藍耳病病通用型/高致病性豬藍耳病病(PRRSV-U/PRRSV-M)核檢測試盒(熒光-PCR法)Molluscan Cardioexcitatory Neuropeptide
0.938ng/ml豬瘟病/豬藍耳病病通用型(CSFV/PRRSV-U)核檢測試盒(熒光-PCR法)FLRFamide
CHL倉鼠肺細胞人管內(nèi)皮細胞生長因子受體3(VEGFR-3/Flt-4)ELISA試盒膽乳瓊脂培養(yǎng)基(DHL)
人管內(nèi)皮細胞生長因子受體3(VEGFR-3/Flt-4)ELISA試盒DHL瓊脂(膽乳瓊脂)
人管內(nèi)皮細胞生長因子受體1(VEGFR-1/Flt1)ELISA試盒亞鉍瓊脂(BS)
人管內(nèi)皮細胞生長因子受體1(VEGFR-1/Flt1)ELISA試盒亞硒鹽增菌液(SF)
人管內(nèi)皮細胞生長因子D(VEGF-D)ELISA試盒亞硒鹽胱氨增菌液(SC)
人管內(nèi)皮細胞生長因子D(VEGF-D)ELISA試盒四磺鈉亮綠增菌液基礎(chǔ)(TTB)
人管內(nèi)皮細胞生長因子C(VEGF-C)ELISA試盒四磺鈉煌綠增菌液基礎(chǔ)(TTB)
人管內(nèi)皮細胞生長因子C(VEGF-C)ELISA試盒氯化鎂孔雀綠增菌液(MM)
人管內(nèi)皮細胞生長因子D(VEGF-D)ELISA試盒麥康凱瓊脂NO.3
人管內(nèi)皮細胞生長因子D(VEGF-D)ELISA試盒弧菌顯色培養(yǎng)基選擇性添加凍干試
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